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6-27
DNA螢光染色法·原理︰利用螢光染劑(bisbenzimide,Hoechst33258)偵測支原體污染。此染劑會結合到DNA之Adenosine-Thymidine(A-T)rich區(qū)域,因為支原體之DNA中A-T含量占多數(shù)(55~80%),所以可將其染色而偵測。被支原體污染之細胞經(jīng)染色后,在細胞核外與細胞周圍可看到許多大小均一之螢光小點,即為支原體之DNA,證明有支原體之污染?!ぬ攸c︰簡單、經(jīng)濟與靈敏,廣泛使用,可作為例行之偵測步驟??梢詡蓽y不易培養(yǎng)之支原體,例如M.hy...
6-22
細胞名稱:4T1小鼠乳腺癌細胞介紹:4T1是從410.4瘤株中未經(jīng)誘變篩得的6-硫鳥嘌噙抗性細胞株。當注射到BALB/c小鼠中時,4T1自發(fā)產生高轉移腫瘤,可轉移到肺,肝,淋巴結和大腦,同時在注射部位形成始發(fā)灶。誘導轉移時不需要摘除始發(fā)灶。4T1細胞在BALB/c小鼠中的生長與轉移特性與人體中的乳腺癌十分相近。這種腫瘤是人VI期乳腺癌的動物模型。4T1-誘導的腫瘤在手術后及未手術情況下轉移的動力學相近,可以用作手術后及未手術模型。跟其他腫瘤模型相比,由于4T1的抗6-硫鳥嘌噙...
6-20
細胞培養(yǎng)板的選擇細胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536孔等;根據(jù)材質的不同有Terasaki板和普通細胞培養(yǎng)板。具體選擇時根據(jù)培養(yǎng)細胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實驗目的而定。(1)平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇不同形狀的培養(yǎng)板有不同用途。培養(yǎng)細胞,通常是選用平底的,這樣便于鏡下觀測、有明確的底面積、細胞培養(yǎng)液面高度相對一致。因此做MTT等實驗時,無論是貼壁和懸浮細胞,一般選用平底板。測...
6-16
細胞培養(yǎng)常用培養(yǎng)基及基本特性1、RPMI-1640MediumRPMI-1640廣泛應用于哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞,雜交瘤細胞的培養(yǎng),是目前應用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。2、MinimumEssentialMedium(MEM)也稱zui低必需培養(yǎng)基,它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單,...
6-15
夏天到了,細胞更容易被污染,很多養(yǎng)細胞的朋友在這方面困惑頗多,今天針對貼壁生長的細胞談談。在討論之前,大家首先要有一個概念,即潔凈區(qū),并不是沒有細菌,而是細菌的數(shù)量非常少,在我們的潔凈操作臺里,并不是真正一個細菌都沒有的,所以在操作的時候還是要盡量利索迅速地完成操作。盡量減少進入培養(yǎng)體系細菌的數(shù)量。所以處理細菌污染的重要原則就是:無限地稀釋細菌的濃度,無限地減少細菌的數(shù)量!對于細菌污染(常見為金黃色葡萄球菌和大腸桿菌);污染處理流程1、將污染的培養(yǎng)液倒掉,轉燒瓶口,加入10m...
6-12
影響細胞生長的幾點因素,摘要:細胞在體外進行培養(yǎng),失去了機體的調節(jié)和控制,因此,除滿足營養(yǎng)的要求外,還必須使細胞生存環(huán)境晝接近活體的環(huán)境.外環(huán)境的培養(yǎng)條件如溫度、滲透壓、酸堿度等均能影響細胞的生長.一、溫度:一般哺乳類及禽類細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度是37~38℃.溫度過高或過低都會影響到細胞的生長.細胞耐受低溫的能力比抗熱的能力強,在低溫下,細胞的代謝活力及核分裂降低.溫度低于0℃時,雖影響細胞代謝,但并無傷害作用.把細胞置于23~25℃時,細胞仍能生存和生長,但速度減緩,不過...
5-30
科研同學養(yǎng)細胞,都把細胞當成自己的娃,娃生活地怎么樣,心情好不好,快不快樂,是每天都要關注的事情。因為擔心一不留神,細胞娃就生存地不好,甚至于受到污染,細胞over了!如何讓細胞快樂,我們一起往下看!1.確保所有實驗室材料都無菌交叉污染是細胞培養(yǎng)的大敵。即使是zui輕微的污染,也可能毀了幾個星期的成果。因培養(yǎng)箱內溫暖潮濕,真菌極易生長,因此必須注意定期清潔。此外,在將培養(yǎng)瓶、移液管及其他的相關物品放入超凈臺之前,應用酒精擦拭干凈,以避免污染。2.小心處理您的培養(yǎng)物細胞培養(yǎng)的脆...
5-20
癌細胞是能快速繁殖再生的異常細胞,這種不受遏制的細胞生長速度會促使組織塊和腫瘤的生成及惡化。腫瘤持續(xù)生長惡化,其中一些被稱為惡性腫瘤,它們可以從一個部位擴散到其它地方。癌細胞與正常細胞在很多地方都存在不同表現(xiàn)。癌細胞不會生物性老化,可以持續(xù)分裂,也不會響應細胞終止的信號。以下關于癌細胞十個有趣真相可能會讓你大吃一驚。1.癌癥的類型超過100種。癌癥的類型多種多樣,這些癌癥有可能會演變成任何類型的體細胞,通常根據(jù)病變的器官、組織或細胞命名。zui常見的癌癥類型是惡性腫瘤或稱其為...

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